人肥胖抑制素(Obestatin)elisa試劑盒基本介紹

肥胖抑制素是美國(guó)斯坦福大學(xué)的研究人員在Science近年發(fā)現(xiàn)的，他在雜志上生成找到了一種可抑制饑餓感的激素, 是人體內(nèi)基因會(huì)誘發(fā)產(chǎn)生的兩種作用*相對(duì)的激素。而且，研究人員已經(jīng)對(duì)這種被稱為“肥胖抑制素（Obestatin）”的激素進(jìn)行了測(cè)試，抑制肥胖效果很理想。

肥胖抑制素是一種胃生長(zhǎng)素基因編碼的生物活性多肽，可以拮抗胃生長(zhǎng)素的食欲刺激作用．肥胖抑制素是一種可以誘發(fā)食欲的腦腸激素，其生物活性依賴于前體原翻譯后的剪切和乙酰化修飾后形成一種具有生物活性的多肽。借助于生物信息學(xué)預(yù)測(cè)，胃生長(zhǎng)素前體翻譯后還存在不同剪切方式，提示可能存在著另外一種多肽激素。我們從大鼠的胃組織中成功分離出這種激素，命名為肥胖降脂素（肥胖抑制素）（obestatin）——其中“obe”是拉丁來(lái)源的詞匯“obese（肥胖）”的縮寫，表示大量攝食，而“statin”則表示“抑制”。與胃生長(zhǎng)素刺激食欲的作用相反，用肥胖降脂素（肥胖抑制素）處理大鼠后，發(fā)現(xiàn)大鼠攝食量和空腸收縮次數(shù)減少，體重增加速度變緩。肥胖降脂素（肥胖抑制素）可與孤兒G蛋白受體GPR39結(jié)合。由同一個(gè)胃生長(zhǎng)素基因編碼，經(jīng)過(guò)翻譯后的不同片斷剪切和不同類型的修飾（胃生長(zhǎng)素乙酰化修飾; 肥胖降脂素（肥胖抑制素）C末端酰胺化）產(chǎn)生的兩個(gè)多肽激素對(duì)體重調(diào)節(jié)卻起著相反的作用。　肥胖抑制素是通過(guò)對(duì)人體內(nèi)存在著一種被稱為“Grelin”的激素來(lái)發(fā)揮作用的。它主要存在于我們的胃部并且會(huì)增強(qiáng)食欲。科學(xué)家們認(rèn)為，Grelin曾幫助原始人類成功地存活了下來(lái)：這種激素會(huì)促使我們的祖先在那個(gè)頻繁遭遇饑餓威脅的年代大量消耗掉富余的食物。不過(guò)，在現(xiàn)代的發(fā)達(dá)國(guó)家中，這種激素的過(guò)量存在可能會(huì)導(dǎo)致人體發(fā)胖，所以，通過(guò)肥胖抑制素可以有效地減小人體發(fā)胖的幾率。

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ELISA試劑盒即酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)，是一種常用的固相酶免疫測(cè)定辦法。 因?yàn)镋LISA辦法活絡(luò)，特異性強(qiáng)不需要特殊設(shè)備，所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響要素較多，并且其操作中有一定的技能請(qǐng)求，在臨床查驗(yàn)中除正常反響外，有時(shí)常可見(jiàn)到一些過(guò)錯(cuò)成果（即假陽(yáng)性或假陰性）如標(biāo)本的影響上海勁馬為我們解讀ELISA檢查的影響要素。

標(biāo)本的影響

溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清選用ELISA法檢查易發(fā)生假陽(yáng)性。也許是溶血血清中富含過(guò)氧化酶物質(zhì)（紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），ELISA試劑盒在洗刷過(guò)程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧（O），從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍(lán)色，發(fā)生假陽(yáng)性。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。

標(biāo)本受細(xì)菌污染。因菌體中也許富含內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶，因而，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣，亦可發(fā)生非特異性顯色而攪擾測(cè)定成果。

ELISA試劑盒標(biāo)本保留不妥。在冰箱中保留過(guò)久的標(biāo)本，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)致使本底過(guò)深、形成假陽(yáng)性；為戰(zhàn)勝上述攪擾，ELISA試劑盒測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮收集；如不能當(dāng)即測(cè)定，5 d內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)有些濃縮，散布不均，應(yīng)充沛混合后再測(cè)定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔，不行激烈振動(dòng)。

塑料試管能吸附抗原物質(zhì)，樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量降低形成假陰性。運(yùn)用真空采血管；并運(yùn)用非抗凝標(biāo)本，肝素抗凝血漿會(huì)添加OD值，EDTA、酶抑制劑（如NaN3）可抑制ELISA體系中辣根過(guò)氧化物酶活性。

ELISA試劑盒標(biāo)本凝結(jié)不全。 在工作中，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢查，ELISA試劑盒常在血液還未開始凝結(jié)時(shí)即強(qiáng)行離心別離血清，使血清中仍殘留有些纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過(guò)程中能夠形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊，易形成假陽(yáng)性成果；因而血液標(biāo)本收集后有必要使其充沛凝結(jié)后再別離血清。

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