南京信帆生物推新：血管緊張素2/ANG-2 ELISA試劑盒*!

ANG-2即血管生成素-2，是一個(gè)分子量約為70 kDa的分泌型糖蛋白，在血管生成、炎癥和血管發(fā)育中起復(fù)雜作用，在高度血管生成組織的血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞、肺上皮細(xì)胞、分化的肌管、神經(jīng)祖細(xì)胞中表達(dá)。ANG-2促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的生存、增殖和遷移，并促進(jìn)出芽式血管生成，它誘導(dǎo)血管壁周細(xì)胞的損失，增加血管通透性。ANG-2對于淋巴管的發(fā)育、淋巴管和血管的后天重塑是*的。

血管肉瘤患者的ANG-2水平是升高的，研究表明，ANG-2參與感染性休克的發(fā)病。血清中ANG-2的表達(dá)與多發(fā)性骨髓瘤的生長、血管生成和口腔鱗狀細(xì)胞癌的整體存活有關(guān)。循環(huán)的ANG-2是慢性透析的兒童早期心血管疾病的一個(gè)標(biāo)志，卡波氏肉瘤相關(guān)皰疹病毒引起內(nèi)皮細(xì)胞快速釋放出ANG-2。

人血管緊張素2（ANG-2）ELISA試劑盒檢測步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀 釋。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、

待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl， 然后再加待測樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡 量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此

重復(fù) 5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同 3。

8. 洗滌：操作同 5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10.  終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.  測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。