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南京信帆-兔抗卵清蛋白(抗血清)抗原的制備流程

更新時間:2020-06-05      瀏覽次數:1461

南京信帆-兔抗卵清蛋白(抗血清)抗原的制備流程

 

抗血清copy也稱高免血清,指將處于高度免疫狀態下的動物(自然感染某病原體發病后耐過而恢復健康的動物,或健康動bai物經連續幾次接種疫苗而體內產生高滴度抗體的動物)進行采血后分離到的含抗體滴度較高的血清。這類抗血清可du用于特異性動物疫病的緊急預防和緊急治療,由于其直接增加機體內的抗體含量,故產生的防治zhi效果快而顯著。但因其不能刺激機體繼續產生抗體,故dao在體內維持時間不長,免疫期較短,但對發病早期的動物療效顯著。

 

抗原制備

1)抗原稀釋:用滅菌生理鹽水將抗原稀釋為2mg/ml,于免疫前一天加入溶液,使每毫升抗原溶液含青霉素1000 UI,鏈霉素1000 UI,放4℃過夜(一般可不加青、鏈霉素)次日取出,與佐劑混合制成乳劑后用于動物免疫。

 

佐劑和抗原乳劑的配制:佐劑的配制:福氏*佐劑(Freund’s complete adjuvant),各實驗室的配方不盡相同


3、免疫途徑,劑量和免疫周期:抗原注射途徑可根據不同抗原及試驗要求,選用皮內、皮下、肌肉、靜脈或淋巴結內等不同途徑注入抗原進行免疫。一般常采用背部、足掌·耳后等處皮內或皮下多點注射。初次免疫與第二次免疫的間隔時間多為2~4周。

 

試血,測定抗體效價:一般在第三次免疫后7~10天即可于兔耳靜脈或小鼠尾尖取少量血,分離出血清之后進行試血。


放血:經效價檢查合格后即可放血。放血前動物應停食12 h,以減少血清中的脂肪含量。如擬保留該免疫動物,可直接由心臟取血,或切開耳緣靜脈滴血或心臟穿刺取血。取血后由靜脈緩緩注入等量5%葡萄溶液以補足失血量。


分離血清:必須在無菌條件下進行,待收集于平皿或三角瓶內的血液凝固之后,用無菌滴管在無菌環境(例如超凈工作臺)中把xue塊與瓶壁剝離后,放入37℃,1~2h取出后放入4℃過夜,使血清充分析出(不能冰凍,否則產生溶血),經離心沉淀分出血清,放進低溫冰箱保存。使用前必須經過簽定合格后再分裝保存備用。


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