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重組牛腸激酶(rb-EK)適用于基因工程融合蛋白的酶切。

更新時(shí)間:2022-12-21      瀏覽次數(shù):674

重組牛腸激酶(rb-EK)適用于基因工程融合蛋白的酶切。


相關(guān)介紹:

腸激酶(EC 3.4.21.9)是一種絲氨-酸蛋白水解酶,能高效專一地識(shí)別蛋白質(zhì)中Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DDDDK)序列,并在賴氨酸(Lys,K)的C端水解肽鍵,產(chǎn)生切割,在生物體內(nèi)水解胰蛋白-酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橐鹊鞍?酶,由于腸激酶具有高度專一性和高效酶切特性,廣泛應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā)。


天然腸激酶由1條115 kDa的重鏈和1 條35 kDa的輕鏈組成,重鏈起錨定細(xì)胞膜的作用,輕鏈具有全酶完整的催化活性。本產(chǎn)品采用大腸桿菌分泌表達(dá)牛腸激酶的輕鏈活性核心區(qū)域(235A.A., 26.2 kDa),比活性更高,特別適用于基因工程融合蛋白的酶切。


品    名:重組牛腸激酶(Recombinant Bovine Enterokinase, rb-EK)

規(guī)    格:200 U(液體),1000 U(液體),100 μg

產(chǎn)品形式:液體為1 U/μl rb-EK, 50 mM Tris-HCl, 50%甘油, pH 8.0;凍干粉凍干前為50 mM Tris-HCl(pH 8.0)酶溶液

分 子 量:26.2 kDa(SDS-PAGE檢測(cè)約為30 kDa)

等 電 點(diǎn):5.20

比 活 性:≥40000 U/mg,即1 mg rb-EK至少切割2000 mg融合蛋白。

純    度:≥95%(SDS-PAGE檢測(cè))

A280nm(1 mg/mL):2.06

內(nèi) 毒 素:≤5 EU/mg

來(lái)    源:大腸桿菌

保存條件:-20℃保存

活性定義:25℃,反應(yīng)緩沖液為50 mM Tris-HCl (pH 8.0),底物為50 μg 1 mg/ml含酶切位點(diǎn)的融合蛋白,16 h內(nèi)切割95%的融合蛋白所需的酶量為1個(gè)酶活力單位(1 U)。


注意事項(xiàng):

1)一些試劑會(huì)影響酶的活性,如 >2 M Urea,>250 mM NaCl,>20 mM β-ME,>0.1% SDS,>50 mM Imidazole。樣品中如果含有這些成分,需要透析至50 mM Tris-HCl (pH 8.0)。

2)磷酸鹽會(huì)抑制腸激酶的活性,應(yīng)避免使用磷酸鹽緩沖液作為酶切體系。

3)本產(chǎn)品僅限于科研使用。


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