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ELISA和生化樣本的準(zhǔn)備要求有哪些

更新時(shí)間:2023-08-30      瀏覽次數(shù):442

ELISA和生化樣本的準(zhǔn)備要求有哪些

南京信帆生物通過(guò)ELISA和生化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù),樣本的準(zhǔn)備方法如下,以下所有樣本必須盡量新鮮!

1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)

準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量按重量(mg):體積(μL)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,研磨儀(KZ-5F-3D)勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000rpm/min,離心10min,取上清液進(jìn)行測(cè)定。


2、血清樣本(干冰運(yùn)輸)

全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2h內(nèi)或4℃過(guò)夜后于4℃ 3000rpm/min離心15min,取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝,并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測(cè)。


3、血漿樣本(干冰運(yùn)輸)

1.生化、ELISA:可用肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于4℃ 3000rpm/min離心15min,取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝,并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測(cè)。

2.凝血四項(xiàng):抽取靜脈血,按照9份靜脈血、1份抗凝劑的比例加入到3.8%(或3.2%)的枸櫞酸鈉抗凝管中,輕輕顛倒10次使之充分混勻,不得有凝塊,不得形成泡沫。

3.采樣后應(yīng)盡快分離血漿(60分鐘內(nèi)進(jìn)行),將標(biāo)本以3000rpm/min離心10-15min,使血漿分層,取上層血漿。

4.分離后的血漿-20℃以下密封可保存2周。干冰運(yùn)輸。


4、細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS沖洗2次后,用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來(lái),將培養(yǎng)液3000rpm/min,離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸。

懸浮細(xì)胞:將培養(yǎng)液3000rpm/min,離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞上清:標(biāo)本于4℃,3000rpm/min離心15min取上清,上清立即用于實(shí)驗(yàn),或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。


5、全血樣本(4℃運(yùn)輸)

EDTA抗凝管取適量抗凝全血。EDTA與血液最佳比例為1.5mg:1mL,樣本量不可太多或太少,取樣后上下輕輕顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻。4℃運(yùn)輸,不可與冰袋直接接觸,不可猛烈撞擊。抗凝全血僅用于血常規(guī)檢測(cè),不可運(yùn)輸后再離心取血漿。


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